一、微生物實(shí)驗室注意事項

1、工作室要矮小平整、光滑、無(wú)凹凸不平或棱角、四壁及屋頂用不透水之材質(zhì)，便于擦洗及殺菌。

2、室內采光面積應大，從室外應能看到室內的情況。

3、為保證無(wú)菌室的潔凈，無(wú)菌室周?chē)柙O緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無(wú)菌室。

4、無(wú)菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以一米為宜，其電源開(kāi)關(guān)應設在室外。

5、無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應設推拉門(mén)，門(mén)與窗平齊，門(mén)縫要封緊，兩門(mén)要錯開(kāi)，以免空氣對流造成污染。

二、使用無(wú)菌室注意事項

1、無(wú)菌室要保持清潔整齊，室內僅存放必要的檢驗用品，如：酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、記號鉛等。

2、室內檢驗用具及桌凳應保持固定位置，不隨便移動(dòng)。

3、每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作臺、門(mén)、窗、桌凳及地面，然后用二氧化氯溶液噴霧消毒空氣或過(guò)氧乙酸熏蒸，紫外燈殺菌。

4、定期檢查室內空氣無(wú)菌狀態(tài)，進(jìn)行細菌和霉菌的檢查。

5、無(wú)菌室殺菌前應將所有物品置于操作之部位，然后打開(kāi)紫外燈殺菌半小時(shí)，時(shí)間一到，關(guān)閉紫外燈待用。

6、操作應嚴格按照無(wú)菌操作規定進(jìn)行，操作少說(shuō)話(huà)，不喧嘩，以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。

三、配制培養基注意事項

1、滅菌時(shí)嚴格按照規定加熱、加壓，切忌時(shí)間過(guò)長(cháng)壓力過(guò)高，否則會(huì )造成營(yíng)養成分的破壞。

2、切忌使用銅鍋、鐵鍋配制培養基。

3、培養基不能二次高壓滅菌。

4、劃線(xiàn)用培養基可放入冰箱或培養箱除去水分。 

四、無(wú)菌操作注意事項

1、進(jìn)入無(wú)菌室之前先進(jìn)行空氣消毒，工作人員進(jìn)入無(wú)菌室以前，必須于緩沖間更換消毒過(guò)的工作服、工作帽及工作鞋。

2、動(dòng)作要輕，盡量減少走動(dòng)，以免攪動(dòng)空氣。

3、操作要靠近酒精燈火焰區，使用吸管要用吸球。

4、接種環(huán)/接種針用前用后進(jìn)行火焰滅菌。

5、工作結束作好終末消毒，所有培養物均應高壓滅菌后再扔掉，以免污染環(huán)境。

五、菌落總數測定注意事項

1、選取樣品要有代表性，如為固體樣品要多采幾個(gè)部位，液體檢樣要混勻。

2、每次做樣從開(kāi)始到結束都要進(jìn)行超凈臺空氣凈度的監測，同時(shí)對所有滅菌物品做空白對照。

3、為減少稀釋倍數的誤差，在做連續遞增稀釋時(shí)，每一稀釋液應充分振搖使其均勻，同時(shí)每一稀釋度換一支吸管。

4、在進(jìn)行連續稀釋時(shí)，應將吸管內液體沿壁流入，勿使吸管觸及稀釋液。

5、傾倒營(yíng)養瓊脂培養基平板時(shí)，溫度要在46±1℃之間，數量要在15ml左右為宜，不要太多太少。

6、培養物48h培養后培養基失重不超過(guò)15%，培養箱內要放水。

7、檢樣加入平皿后應立即傾注培養基并旋轉混勻，一般從稀釋到傾注不超過(guò)20分鐘。

8、平皿內如有鏈狀菌落生長(cháng)時(shí)：菌落之間無(wú)明顯界限且僅有一條鏈可視為一個(gè)菌落，如為不同來(lái)源的幾條鏈則將每條鏈各做一個(gè)菌落記。

9、做菌落記數時(shí)平板里所有的菌落都要記數。

六、大腸菌群注意事項

1、對乳糖膽鹽管產(chǎn)氣的觀(guān)察只要有氣泡往上冒就算產(chǎn)氣。

2、在伊紅美蘭瓊脂平板上挑取菌落時(shí)一定要選典型菌落。

七、霉菌、酵母菌檢驗注意事項

1、稀釋樣品時(shí)用無(wú)菌水。

2、3天觀(guān)察時(shí)把所有的酵母菌做標記。

3、如果有霉菌被培養出，請不要把皿蓋隨便打開(kāi)，待培養物高壓滅菌后再清洗。

八、壞包分析注意事項

1、對已開(kāi)包的酸包脹包要馬上轉移到無(wú)菌瓶中，已防二次污染。

2、根據壞包的不同表現狀態(tài)適當的選擇培養項目。

3、做微生物培養的同時(shí)測定感官、理化指標，注意其有何變化。

九、商業(yè)無(wú)菌注意事項

1、要求有厭氧培養的一定要在厭氧環(huán)境下培養。

2、取樣測pH值，要與同批正常樣相比，看是否有顯著(zhù)差異。

3、對pH 值有可疑的樣品都要做涂片染色鏡檢，與同批正常樣相比，看是否有明顯的微生物增殖現象。

4、保溫期間出現的脹包，漏包、或開(kāi)包發(fā)現PH、感官異常、變質(zhì)，進(jìn)一步鏡檢發(fā)現有異常數量細菌的樣品均應進(jìn)行劃線(xiàn)培養。